3、细菌-2.细菌形态的检查方法 ...
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一般微生物实验室使用的是普通光学显微镜，其最大分辨率为0.25μm，放大1000倍左右能看清细菌的外形。
一、不染色标本的检查法
直接置于普通光学显微镜或暗视野显微镜下观察，可直接观察到细菌生活状态、运动状态以及繁殖方式等，常用悬滴法或压片法。由于细菌是无色半透明体，直接镜下观察其形态很不清楚，一般要用染色法进行检查。
二、染色标本的检查法
细菌多用碱性染料，如亚甲蓝、结晶紫、碱性复红等。由于细菌的等点为PH2~5，因而在近中性溶液中带有负电荷，易与带正电荷碱性染料的着色基团结合而着色。
（一）单染色法
细菌只用一种染料着色，染色前要将细菌制成标本，过程如下：细菌涂片——干燥——固定——染色——显微镜观察。因单染色法只用一种染料，如用结晶紫染料，细菌则被染成紫色；若用亚甲蓝则细菌被染成蓝色。通过该法，可观察细菌的大小、形态和排列等，但不能鉴别细菌。
（二）复染色法
使用两种或两种以上的染料着色，可将不同种的细菌或同种的细菌的不同结构染成不同的颜色，不仅可以观察细菌的形态和结构，还有助于鉴别细菌种类，故称鉴别染色法。
1.革兰氏染色法（Gram staining）
细菌学上常用染色方法，基本过程：细菌涂片——干燥——固定——结晶紫初染——卢戈碘助染——95%乙醇溶液脱色——苯酚复红复染——干燥——镜检。
（1）结果：染成紫色的细菌为G+菌，如金黄色葡萄球菌、枯草杆菌；染成红色的细菌为G-菌，如大肠埃希菌、伤寒沙门菌。
（2）原理：革兰氏染色法与细菌成分、细胞壁组成差异、细菌等电点等因素有关，但目前认为主要是因为G+细胞壁肽聚糖层厚，脂肪含量少，乙醇不易脱色，故呈紫色；G-刚好相反，所以染成红色。
通过初染和煤染，在细菌细胞膜或原生质体上染上了不溶于水的结晶紫与碘的大分子复合物。
（3）意义：
①革兰氏染色法将细菌分为革兰氏阳性菌和阴性菌，有助于细菌的鉴别。
②由于G+菌大多产生外毒素，G-菌大多产生内毒素，将有助于了解细菌的致病性。
③指导临床用药，如大多数G+菌对青霉素较敏感，而多数G-菌对青霉素不敏感。（抗菌药物选用）
2.抗酸染色法（acid-fast staining）
该法用来鉴别抗酸性细菌和非抗酸性细菌，过程如下：细菌涂片——干燥——固定——苯酚复红复染加温染色——盐酸乙醇脱色——亚甲蓝复染——干燥——镜检。染成红色的细菌称为抗酸性细菌，如结核杆菌、麻风杆菌等；染成蓝色的细菌称为非抗酸性细菌，临床上绝大多数病原菌为非抗酸性细菌。
（三）特殊染色法
细菌的某些结构需要用特殊的染色方法才能着色，如荚膜、芽孢、鞭毛等。
